《表1 引物与探针信息：山羊环状RNA circ＿ZCCHC24表达载体的构建及对颗粒细胞增殖的影响》

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《山羊环状RNA circ＿ZCCHC24表达载体的构建及对颗粒细胞增殖的影响》

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注:加粗标记碱基代表酶切位点，下划线标注碱基代表环化介导序列。

根据前期转录组测序结果分析得到circ＿ZCCHC24的全长序列，设计合成引物对pc-circ＿ZCCHC24-PF/PR，并在上下游引物5′端分别引入了KpnⅠ和BamHⅠ酶切位点（表1），引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成。以山羊DNA为模板，利用上述引物进行PCR扩增，预期片断长度为2 045 bp。PCR扩增反应程序:98℃预变性2 min；98℃变性10 s，60℃变性10 s，72℃变性20 s，40个循环；72℃延伸5 min；4℃保存。PCR仪为Mini CyclerTM基因扩增仪。琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物，利用DNA快速纯化回收试剂盒回收目的片段，具体操作按产品说明书进行。