《表2 引物信息:藏猪EGLN1基因exon 4及部分内含子变异研究》

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《藏猪EGLN1基因exon 4及部分内含子变异研究》


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采用常规酚-氯仿抽提法提取基因组DNA。根据杜洛克猪EGLN1基因全序列(登录号NW_001885473)设计引物(表2),由上海生工生物工程有限公司合成。PCR扩增采用50μL体系进行扩增,反应条件:94℃预变性3 min,94℃变性30 s、56.5℃退火30 s、72℃延伸30 s、共30次循环,72℃延伸10 min,4℃保存。扩增产物经2.0%琼脂糖凝胶、150 V电压下电泳检测20 min,将条带清晰明亮目的产物送至北京六合华大基因科技股份有限公司进行测序。