《表1 引物序列:两株PRRSV NSP2不同位置缺失基因工程病毒的生物学特性分析》

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《两株PRRSV NSP2不同位置缺失基因工程病毒的生物学特性分析》


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在PRRSV GSWW/2015/D5分子克隆的基础上进行NSP2 D13缺失(缺失NSP2第467~570位氨基酸),以pGS-A质粒为模板,扩增D13缺失序列上下游片段,上游片段扩增引物为D-F和D13-1R(表1),片段长度为2 305 bp,下游片段扩增引物为D13-2F和D-R(表1),片段长度为1 637 bp。将上下游片段回收纯化后,以D-F和D-R为扩增引物进行上下游片段的融合,融合基因片段D13F长度为3 942 bp。在PRRSV GSWW/2015/D5的基础上设计NSP2第628~747位120个氨基酸的缺失,将缺失该区域后的SpeⅠ-SacⅠ位点间基因片段D14F (3 709 bp)委托南京金斯瑞生物科技公司进行合成。