《表3 玉米秸秆发酵处理体系》

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《秸秆饲料化全细胞纤维素酶的构建及应用》

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为研究乳酸菌与全细胞纤维素酶制剂混合使用是否与其单独使用发酵效果有所差异，应用效果实验设置为5个发酵组合，分别是：A组（乳酸菌制剂发酵）、B组（全细胞酿酒酵母纤维素酶发酵）、C组（乳酸菌制剂与全细胞酿酒酵母纤维素酶混合发酵）、D组（商用青贮剂发酵）、E组（自然发酵），另用相同来源而未发酵的秸秆设置为F组（对照），每个组各设置3个平行样品，实验组添加玉米秸秆原料均为50 g，添加发酵添加剂液体均为100 mL（生物量通过OD600标定）。但乳酸菌制剂活化使用的LB培养基相关培养原料（主要成分为1%蛋白胨、0.5%酵母抽提物和1%葡萄糖）中氮源含量只有全细胞纤维素酶制剂活化使用的YPD培养基（主要成分为2%蛋白胨、1%酵母抽提物和2%葡萄糖）的一半，为确保各实验组额外氮源添加量的一致，使用LB培养基活化的乳酸菌制剂取100 mL，而使用YPD培养基的全细胞纤维素酶制剂取50 mL，以此推算混合发酵组取25 mL全细胞纤维素酶制剂与50 mL乳酸菌制剂混合，商用青贮剂按使用方法需50 mL，各实验组都稀释至100 mL使用。处理体系见表3。将烘干后的玉米秸秆倒入1000 mL容量烧杯中，将菌液与水按表1中的量混合后倒入喷壶中，均匀喷洒在秸秆上，并不断搅拌，直至喷洒完毕后静置15 min使秸秆充分吸收菌液，将处理好的样品倒入真空包装袋中，使用真空封口机封口后于28℃恒温培养箱中恒温发酵14 d。