《表3 VQ基因之间的共线性关系》

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《双子叶植物VQ基因家族的全基因组鉴定与盐胁迫下的表达模式分析》


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基因芯片和转录组测序(RNA-seq)技术是检测基因表达水平的重要手段。本研究通过查询NCBI GEO数据库,获取拟南芥GSE16765,葡萄GSE31594中盐胁迫相关的基因芯片数据,以及Sergel A等公布的不同时空和逆境胁迫下81个转录组数据,并筛选出3个物种中VQ基因在Na Cl处理下的表达水平(图5)。结果显示,拟南芥中25个(80%)VQ基因在叶片中检测到表达值,其中At VQ13、At VQ20、At VQ21、At VQ9、At VQ6、At VQ11、At VQ3、At VQ29、At VQ12、At VQ18和At VQ19该11个VQ基因对100 mmol·L-1的Na Cl处理有较高的敏感性(图5A)。GSE31594基因芯片以未处理、120 mmol·L-1 Na Cl分别处理1、4、8和24 h的葡萄为实验组,筛选VQ基因的表达水平。如图5B所示,葡萄中仅5个基因与探针匹配,其中Vv VQ16、Vv VQ17、Vv VQ5和Vv VQ6在盐胁迫下高表达;并且Vv VQ5在未处理和盐胁迫对照组实验中表现出差异表达的趋势。根据杨树VQ基因表达水平的结果,将51个基因聚类为3类:cluster I、cluster II和cluster III(图5C)。Cluster I中有8个基因,基因表达水平较高;cluster II有25个基因,表达水平偏低,尤其是Pt VQ49、Pt VQ36、Pt VQ2和Pt VQ15 4个基因表达水平为0;cluster III中有18个基因,表达水平位于cluster I与cluster II中的基因之间。Pt VQ47、Pt VQ20、Pt VQ9、Pt VQ50、Pt VQ34、Pt VQ1、Pt VQ11、Pt VQ40、Pt VQ13、Pt VQ23、Pt VQ51、Pt VQ4和Pt VQ19对盐胁迫有响应,其中Pt VQ13在用100mmol·L-1 Na Cl处理叶片7 d后,基因表达水平显著提高。为进一步验证VQ基因响应盐胁迫表达水平,本研究随机选择了杨树中Pt VQ1、Pt VQ18和Pt VQ31进行荧光定量PCR检测。结果显示,Pt VQ1、Pt VQ18和Pt VQ31对200 mmol·L-1 Na Cl处理均有响应。