《表1 MIase的动力学常数》

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《D-甘露糖异构酶的克隆表达及酶法制备D-甘露糖》


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酶促反应动力学性质的研究是建立酶催化反应过程动力学模型的基础,有助于认识整个酶促反应过程的动力学机制[17]。测定酶促反应动力学常数时,选择适合的底物浓度、酶浓度和反应温度非常重要[18]。在浓度为1~2 000 mmol/L范围内,配制一系列非线性浓度的D-果糖和D-甘露糖溶液的底物溶液,加入定量酶液后,在40℃分别反应10 min和5 min,用Lineweaver-Burk双倒数法作图,以底物浓度的倒数1/[S]为横坐标,反应初速度的倒数1/V为纵坐标作图,求得该酶分别以MIase和D-果糖为底物的酶促反应动力学常数Km和催化常数kcat,见表1。