《表1 Real-time PCR引物序列》

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《Srsf1敲低对GT1-7细胞基因表达谱的影响》

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细胞按l×106（个/孔）密度接种于六孔板培养，待细胞长满后吸去上清，用预冷的PBS洗3次后，每孔加入l m L Trizol，抽提细胞总RNA。取2μL至分光光度计用Trizol法分别提取总细胞RNA，使用Nanodrop分光光度计对RNA定量。检测纯度和浓度，1:l进行琼脂糖电泳检测其完整性，余下部分立即保存于-80℃超低温冰箱中，或立即用于反转录反应。取1μg RNA经过Dnase I处理后，用逆转录试剂盒逆转录成cDNA，稀释5倍后作为荧光定量PCR的模板进行Real-time PCR。相关的引物序列见表1。结果采用2-△△Ct的方法进行分析，P<0.05作为显著性差异标准。