《表6 不同DNA模板量的转基因成分实时荧光PCR检测结果》

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《大豆粉转基因成分能力验证样品的检测分析》

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适宜的模板量是保证特异性扩增的前提。Ct值与起始模板量在一定范围内存在线性关系。起始模板量越低，Ct值越大。但起始模板量过多，则导致非特异性扩增的上升，Ct值增大，甚至抑制PCR反应，出现阴性结果。因此，对阳性样品模板量的梯度试验，可得到外源基因检测最合适的DNA模板量。由表6结果可见，QIAGEN试剂盒提取的DNA，对3种外源基因的检测，模板量1～6μL，Ct值均能小于35，能满足判定条件。但对外源基因pCaMV35S的检测，加入模板量4μL，对外源基因tNOS的检测，加入模板量4μL。对外源基因CP4-EPSPS的检测，加入模板量6μL，其Ct值相对最低，灵敏度最高，更能满足检测要求。