《表1 引物信息:PI3K/AKT/SIRT1信号通路介导H_2S调节肝胆固醇代谢》

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《PI3K/AKT/SIRT1信号通路介导H_2S调节肝胆固醇代谢》


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于6孔板中接种培养HepG2细胞,按要求进行分组,NaHS干预条件为100μmol·L-1干预24 h,LY294002在NaHS前1 h提前干预,浓度10μmol·L-1。干预完成后用Trizol试剂提取细胞内总RNA,检测浓度和纯度均合格后以总RNA为模板按照逆转录试剂盒说明书进行操作,逆转录合成cDNA。实时荧光定量PCR法检测胞内SIRT1、固醇反应元件结合蛋白(SREBP)-1c、SREBP-2、CYP7A1和HMGCR基因表达,以GAPDH为内参,用算术公式“2-ΔΔCT”对结果计算分析。内参基因及目的基因的引物信息见表1。