《表2 主要肠道菌群qPCR引物[6-8]》

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《急性心肌梗死患者肠道菌群的变化》

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将保存的大便标本于室温条件下融化后，加入200mL无菌水稀释，稀释完成后，取5 mL混悬液置于离心机以5 000r/min离心10 min。然后，采用QIAGEN（德国）DNA提取试剂盒对离心后的上清液中的细菌DNA进行提取，提取操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。提取完成后采用SYBR Green PCR Master Mix试剂盒（TaKaRa公司，中国）对细菌进行qPCR分析，各细菌引物见表2。其后将产物进行分析，同时用10倍稀释的标准质粒DNA在同一检测平台上进行检测，用于确定目标细菌DNA量。数据分析采用Ⅶa7软件进行，所有反应均一式3份，重复进行，在每一次分析进行模板控制，细菌水平按照相应公式计算。