《表7 Ⅰ相代谢孵育体系组成 (n=3)》

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《玳玳果黄酮降脂提取物效应组分大鼠肝肠微粒体代谢特性研究》


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大鼠肝/肠微粒体取出解冻,移液器混匀,精密吸取50μL微粒体蛋白溶液,加入925μL新鲜配制的NADPH再生系统、5μL底物及Ⅰ相代谢启动子溶液20μL,移液器吹打混匀后分装成5管,以上操作均在冰浴中进行(有机溶剂含量不超过1%),孵育液置37℃恒温孵育箱,预孵育5 min后,启动反应并开始计时,分别在0,30,60,90,120min时取样测定,平行3次实验。另制备缺启动子的阴性对照组(等体积1%NaHCO3代替)及缺微粒体空白对照组(等体积蔗糖溶液代替)平行实验,以各时间点下药物浓度相对0时刻药物浓度平均回收率评价孵育体系中药物的稳定性。反应体系见表7。