《表1 GSTP1基因rs1695 A>G多态性检测引物序列》

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《GSTP1基因多态性与直肠癌化疗短期疗效及毒副反应的关系》

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所有患者均于化疗前采集静脉血2 m L，采用全血基因组DNA提取试剂盒（美国Invitrogen）提取DNA，采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱获取患者GSTP1 rs1695 A>G基因型:（1）首先通过聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）扩增DNA，引物信息见表1，反应体系:Tap多聚酶0.5 U，DNA模板1μL，各引物浓度0.1μmol/L，各dNTP浓度0.5μmol/L，MgCl2浓度2 mmol/L，体系总体积5μL。反应条件:95℃15 s；94℃20 s，56℃30 s，72℃60 s，共45个循环；72℃3 min。（2）对PCR产物进行纯化，纯化后产物进行单碱基延伸。反应体系:PCR纯化产物7μL，延伸混合物2μL。反应条件:94℃30 s；94℃5 s，52℃5 s，80℃5 s，共45个循环；72℃3 min。最终结果通过TYPER 4.0软件分析。