《表1 hcalp1基因相关引物》
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《美国白蛾中肠碱性磷酸酶HcALP1与苏云金杆菌3种Bt蛋白的体外结合特性分析》
下划线序列分别为EcoRⅠ和NotⅠ酶切位点。
取美国白蛾5龄幼虫中肠,并用DEPC水反复漂洗,于-70℃保存备用。参照RNA提取试剂盒说明书提取中肠总RNA,经反转录合成cDNA。根据美国白蛾中肠转录组数据获得hcalp1基因序列,利用DNAMAN V6.0软件设计1对带有EcoRⅠ和NotⅠ酶切位点的特异性引物HcALP1F和HcALP1R(表1);以中肠cDNA为模板进行PCR扩增,获取hcalp1全长序列,目的基因片段经纯化连接到pMD19-T载体,采用PCR法和酶切进行验证,保存鉴定正确的阳性克隆并送华大基因公司测序。
图表编号 | XD0054606200 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.06.01 |
作者 | 常梦颖、赵丹、张雅昆、徐畅、陆秀君、郭巍 |
绘制单位 | 河北农业大学植物保护学院、河北农业大学植物保护学院、河北农业大学植物保护学院、河北农业大学植物保护学院、河北农业大学植物保护学院、河北省核桃工程技术研究中心、河北农业大学植物保护学院 |
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