《表1 相关基因引物序列信息》
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《从江香猪OB基因序列及对皮下脂肪前体细胞的调控研究》
注:表中下划线为限制性内切酶识别位点。
根据GenBank中公布的猪OB基因的序列(序列号为:U63540.1),运用Primer Premier5.0软件设计从江香猪OB基因的扩增引物,由重庆擎科兴业生物技术有限公司合成,引物序列信息见表1。Trizol法提取从江香猪不同组织器官的总RNA,RT-PCR进行cDNA第一条链的合成。逆转录步骤:向无核酸酶的PCR管中加入Oligo(dT)1μL、随机六聚体引物1μL、组织模板总RNA 1μL,用nuclease-free water补足12μL,然后65℃孵育5 min,再向以上得到的12μL混液中加入10×dNTP Mix 4μL、5×Reaction Buffer 2μL、RevertAid Reverse Transcriptase 1μL、RiboLock RNase Inhibitor 1μL,轻微震荡离心后放入PCR仪,反应程序为:42℃60 min,75℃5 min,4℃短暂保存,后将组织cDNA置于-20℃备用。
图表编号 | XD00179642300 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.07.10 |
作者 | 朱晓锋、谢玲玲、许厚强、田念念、崔小芝、吴巧群、李雄、杨云、倪萌萌 |
绘制单位 | 贵州大学动物科学学院高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室、贵州省种畜禽种质测定中心、贵州大学动物科学学院高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室、贵州大学动物科学学院高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室、贵州大学动物科学学院高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室、贵州大学动物科学学院高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室、贵州大学动物科学学院高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室、思南县畜牧发展中心、贵州大学动物科学学院高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室 |
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