《表1 引物序列:VEGF与CD11c~+ HLA-DR~+树突状细胞在OHSS发生中的相互作用》

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《VEGF与CD11c~+ HLA-DR~+树突状细胞在OHSS发生中的相互作用》


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收集各组DCs,采用Trizol法提取总RNA,定量后取2μg RNA,在梯度PCR仪上反转录合成cDNA,置于-80℃冰箱保存。PCR反应体系(共25μL):SYBR Select Master Mix 12.5μL,cDNA 3.0μL,上下游引物各1.0μL,RNase-Free水7.5μL。每个样本设3个复孔。RCR反应条件:95℃预变性120 s,95℃变性30 s;58℃退火15 s,72℃延伸60 s,共40个循环。以GAPDH作为内参基因,采用2-ΔΔCt法计算各指标mRNA相对表达量。自行设计IL-10、IL-12、IL-18、IL-23、TNF-α以及GAPDH的引物,并由生工生物工程(上海)股份有限公司合成,具体引物序列见表1。