《表1 不同微生物种群的磷脂脂肪酸标记》

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《苹果园不同间作模式对土壤理化性质及微生物群落的PLFA分析》

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土壤微生物生物量的测定采用磷脂脂肪酸法，土壤脂肪酸的提取和检测主要分为四步:提取、分离、酯化、GC-MS分析[11-12]。首先称取10g新鲜土样，加入KOH甲醇溶液使脂肪酸释放并甲酯化，用醋酸溶液中和pH再加10mL正己烷，使FAMEs全部转到正己烷相中后，去除水相，收集有机相，用氮气吹干，将提取的FAMEs溶解于0.5 mL（V正己烷∶V甲基叔丁基醚=1∶1）中，充分溶解后转入GC小瓶，同时加入5μL质量浓度为5 mg/mL的内标十九烷酸甲酯（19∶0），用气相色谱质谱联用仪测定得到各脂肪酸含量。采用SherlockMIS4.5和MIDI软件鉴定分析并估算微生物生物量及菌群结构，脂肪酸采用Frostegrd方法命名[13]，PLFA标记名称参考表1。