《表5 PCR反应体系:甜瓜单性雌花共显性分子标记的开发及应用》

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《甜瓜单性雌花共显性分子标记的开发及应用》


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取0.5 g幼嫩叶片的供试材料,利用CTAB方法提取叶片总DNA(Murray and Thompson,1980)。以供试材料DNA为模板,Indel-1引物进行PCR扩增,采用10μL的反应体系(表5)。扩增程序为:94℃预变性5 min后开始如下循环:94℃变性30 s,58℃退火30 s,72℃延伸30 s,共35个循环。最后72℃终延伸5 min,4℃保存。产物在8%聚丙烯酰胺凝胶电泳中检测,140 v恒压电泳1 h 10 min,银染后在X胶片灯上观察并照相。