《表3 抗体列表：白术多糖对环磷酰胺致雏鸡肝脏细胞凋亡中线粒体通路的影响》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《白术多糖对环磷酰胺致雏鸡肝脏细胞凋亡中线粒体通路的影响》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

Western blot检测雏鸡肝脏组织中线粒体通路相关基因蛋白表达水平。利用特定组织裂解液及蛋白酶抑制剂（PMSF）提取肝脏组织总蛋白，根据BCA蛋白浓度测定试剂盒说明书步骤检测蛋白浓度。将提取的总蛋白在Proteinsimple仪器上作蛋白质印迹。具体步骤如下:严格按照Wes12-230 ku Mouse Master kit试剂盒说明书步骤预混Master mix和Biotinylated Ladder。将预混Master mix与蛋白样品按1.4比例充分混匀后95℃变性5 min。从Wes 12-230 ku Master kit with split Buffer试剂盒中取出装有预制胶的上样板上样，上样完成后，将上样板3 000 r·min-1离心5 min。再将离心后上样板放入仪器中，根据试验需要设置仪器参数，将提取总蛋白恒压375 V电泳25 min后，清洗凝胶，室温封闭5 min，加入相应一抗Caspase-3和Caspase-9（兔多克隆抗体，上海艾博抗贸易有限公司）室温孵育30 min后，用辣根过氧化物酶标记二抗（羊抗兔，北京中杉金桥生物技术股份有限公司）室温孵育30 min，加入显色液显色，读取蛋白目的条带面积，GAPDH为参照蛋白，蛋白相对表达量用目的蛋白条带面积值/GAPDH条带面积值表示。本试验所用抗体相关信息见表3。