《表1 穿心莲内酯及其衍生物对HK-2细胞的半数抑制浓度 (IC50)》

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《穿心莲内酯衍生物的合成及其体外肾毒性筛选》

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以穿心莲内酯（AD）为对照，采用MTT法对目标化合物进行HK-2细胞的体外肾毒性测试。以DMEM/F12培养基作溶剂，将本研究合成的17个化合物均配制成浓度为1 000μmol/L的溶液，然后依次稀释为500、250、125、62.5、31.25、15.63和7.81μmol/L。取对数期生长的HK-2细胞，制成单细胞悬液，调整细胞密度为每毫升5×104个，每孔100μl接种于96孔板中，培养至细胞融合度达到70%～80%时，吸出旧培养液，给药组加入不同浓度的待测化合物溶液100μl，对照孔中加入培养液100μl，每组5个复孔。置37℃培养箱中培养24 h。弃去旧培养基，每孔中加入新培养基100μl，然后每孔加入用PBS配制的5 g/L的MTT溶液20μl，置于细胞培养箱中继续孵育4 h。弃上清，每孔加入DMSO 150μl后，平板摇床振摇5 min以溶解甲臜颗粒。用酶联免疫检测仪在波长570 nm处测定OD值，计算存活率，细胞存活率（%）=（OD待测药物-OD空白）/（OD对照组-OD空白）×100%。实验数据用Graphpad prism 5软件处理，计算半数抑制浓度（IC50）值。活性数据见表1。