《表1 RT-PCR引物：山茱萸总甙干预骨质疏松模型大鼠骨代谢:TRPV6、TRPV5通路的变化》

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《山茱萸总甙干预骨质疏松模型大鼠骨代谢:TRPV6、TRPV5通路的变化》

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RNA的提取按照TRIozol RNA提取试剂盒（Life Technology公司提供）的使用说明进行，具体引物设计见表1。将大鼠股骨骨组织磨碎置于液氮中，取1 mL TRIzol试剂加入100 mg骨组织，按步骤加入0.2 mL氯仿后离心获得溶解在水相中的RNA，加入500μL异丙醇，-20℃静置1 h后4℃离心获得RNA沉淀，加入1 mL体积分数75%乙醇再次离心，将样品于超净工作台上吹干，加入适量DEPC水溶解RNA。用紫外分光光度仪检测RNA纯度符合标准后行下一步实验。于g DNA吸附柱加入RNA并于室温下离心，滤液即消除基因组DNA的目标RNA。RNA热变性（65℃）5 min，冰中冷却后保存于-20℃。分别取样内参及目的基因组c DNA样本，于荧光定量PCR仪反应，20μL的反应体系，样本均行3个平行实验，实验结束，行2-??Ct法分析，获取所有样本目的基因相对表达量。