《表1 VEGF和Ang-2引物序列Tab.1 Primer sequences of VEGF and Ang-2》

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提取视网膜组织总RNA,按照Thermo公司逆转录试剂盒的方法转录成cDNA,以此为模板进行半定量PCR检测,以β-actin基因的表达作为内参照。目的基因VEGF和Ang-2引物序列见表1。反应条件:95℃预变性5 min,95℃变性30s,58℃退火30s,72℃延伸45s,循环35次;72℃延伸10 min。PCR结束后以1.5%琼脂糖凝胶电泳检测扩增目的基因cDNA片段的质量,凝胶成像系统分析,以PCR产物的DNA扩增条带的灰度值和内参物扩增条带灰度值的比值作为VEGF和Ang-2mRNA表达水平。