《表1 DNMT1 Target序列信息Tab.1The sequence information of DNMT1 target》

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《DNA甲基转移酶1在一氧化氮合酶抑制剂诱导的滋养细胞自噬中的作用》

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按Trizol试剂盒说明书提取各组细胞总RNA，根据GeneBank数据库查询DNMT1的基因序列并设计引物。得出DNMT1 Forward:5′-CAGGACTACGCAAGGTTTGAG-3′，Reverse:5′-CG-GATACAAGATAGGCAGAACT-3′；GAPDH Forward:5′-GGTGAAGGTCGGTGTGAACG-3′，Reverse:下游引物5′-CTCGCTCCTGGAAGATGGTG-3′，PCR扩增程序:95℃10 min，95℃15 s，57℃30 s，72℃30 s，72℃10 min，共45个循环，并设空白对照和内参（GADPH）对照同体系扩增。目的基因的相对量根据公式2-△△Ct计算，△△Ct=[Ct（Sample）（待测样本） -Ct（GAPDH）（待测样本） ]-[Ct（GI）（校正样本） -Ct（GAPDH）（校正样本） ]，Sample是目的基因，校正样品是任何被选做代表1倍目的基因表达量的样品，2-△△Ct表示的是目的基因的表达相对于对照组的变化倍数。