《表2 克螟稻定量体系模板优化》

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《基于微滴式和芯片式数字PCR技术的转基因克螟稻成分的定量检测》


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注:/.无扩增出结果。

当加入数字PCR扩增体系中的克螟稻大米样品DNA量从20 ng/μL按6倍稀释6个梯度后,20μL扩增体系中DNA量在10 pg~80 ng之间时,目标基因的理论拷贝数浓度约为8 000、1 333、222、37、6、1 copies/μL。当其含量高达8 000 copies/μL即扩增体系中DNA浓度高达80 ng时,6次重复的RSD高于25%,而其余几个浓度梯度,即使DNA含量低至1 copies/μL,6次重复的RSD仍低于25%(表2),即本研究中克螟稻定量体系中最适DNA添加量在10 pg~13 ng之间。