《表1 不同诱导方法诱导重组蛋白CRT的产率》
注:蛋白浓度由BCA蛋白测定试剂盒测定,菌液的总体积为200mL
由于CRT重组蛋白中含有His标签,本研究利用Ni-NTA亲和层析法纯化目的蛋白,SDS-PAGE电泳结果显示,得到的CRT重组蛋白纯度较高,分子量大小与理论预期值一致(图5)。Western blot分析发现,纯化的重组蛋白能被CRT抗体特异性识别,说明其具有良好的抗原性。通过对两种诱导方式诱导的重组蛋白CRT的产率分析,发现不加入IPTG时在30℃诱导20h比37℃1.0mM IPTG诱导6h的产率大约高6.29倍(表1)。因此,这种方法诱导的重组蛋白CRT达到了实验的需求量,可作为一种CRT的理想诱导方法。
图表编号 | XD004036500 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2018.06.01 |
作者 | 王朋、秦松、覃艳艳、邹黎黎 |
绘制单位 | 三峡大学感染与炎症损伤研究所、三峡大学医学院病原与免疫学系、三峡大学感染与炎症损伤研究所、三峡大学医学院病原与免疫学系、三峡大学感染与炎症损伤研究所、三峡大学医学院病原与免疫学系、三峡大学感染与炎症损伤研究所、三峡大学医学院病原与免疫学系 |
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