《表1 不同诱导方法诱导重组蛋白CRT的产率》

《表1 不同诱导方法诱导重组蛋白CRT的产率》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《重组钙网蛋白原核表达条件优化及蛋白纯化》


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注:蛋白浓度由BCA蛋白测定试剂盒测定,菌液的总体积为200mL

由于CRT重组蛋白中含有His标签,本研究利用Ni-NTA亲和层析法纯化目的蛋白,SDS-PAGE电泳结果显示,得到的CRT重组蛋白纯度较高,分子量大小与理论预期值一致(图5)。Western blot分析发现,纯化的重组蛋白能被CRT抗体特异性识别,说明其具有良好的抗原性。通过对两种诱导方式诱导的重组蛋白CRT的产率分析,发现不加入IPTG时在30℃诱导20h比37℃1.0mM IPTG诱导6h的产率大约高6.29倍(表1)。因此,这种方法诱导的重组蛋白CRT达到了实验的需求量,可作为一种CRT的理想诱导方法。