《表5 引物序列：部分兜兰属植物基于ITS基因的序列分析》

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《部分兜兰属植物基于ITS基因的序列分析》

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采用改良的2×CTAB法提取兜兰属植物DNA（陈业等，2012）。DNA通过0.8%琼脂糖凝胶电泳检测，放在-70℃冰箱备用。PCR反应体系为10μL，其中10×PCR Buffer，DNA浓度60 ng/μL，Mg Cl2浓度2.5μmol/L；dNTPs浓度0.3 mmol/L，上/下游引物（表5）浓度0.5μmol/L；Taq酶0.6 U/10μL。PCR扩增程序为:预变性:94℃，4 min；变性:94℃，50 s，退火，1 min，延伸:72℃，90 s，35个循环；72℃下最后延伸10 min；4℃保存。凝胶电泳检测后把扩增的目的基因送至上海生工生物技术有限公司进行测序。