《表2 引物序列:不同来源饲粮纤维对福建黄兔盲肠发酵参数及菌群数量的影响》

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《不同来源饲粮纤维对福建黄兔盲肠发酵参数及菌群数量的影响》


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根据大肠杆菌、乳酸杆菌、黄色瘤胃球菌、白色瘤胃球菌16S rDNA基因序列设计特异性PCR引物,引物序列见表2。反应体系20μL,其中上、下游引物各2μL,模板DNA 2μL,ddH2O 7.5μL,10×Buffer 2μL,dNTP 4μL,Easytaq 0.5μL。凝胶电泳检测所合成引物的特异性。PCR扩增步骤如下:94℃预变性5 min,94℃30 s,55~62℃30 s,72℃20 s,循环35次,72℃延伸10 min。PCR扩增产物进行1.2%琼脂糖凝胶电泳分析,凝胶成像系统观察片段大小和浓度。