《表2 甘油/甘露醇浓度对电转化效率的影响》

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《一种快速脱盐制备大肠杆菌电转化感受态细胞的方法》

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电击结束后，往复苏培养基中添加一定浓度的渗透溶液[15]能够有效地提高电转化效率；也有研究认为，使用一定浓度的渗透溶液重悬细胞再进行电转化，对于效率的提高也有帮助[16]。为了进一步探究感受态细胞中渗透溶液对其电转化效率的影响，经密度梯度离心后（图1b），分别以预冷去离子水（即甘油与甘露醇浓度均为0）、20%甘油水溶液以及20%甘油水溶液加入不同质量分数的甘露醇（m/V）重悬细胞，辅助维持细胞在离心过程中的渗透压平衡[11]。经3次重复试验，由表2可知，以去离子水重悬细胞进行电转化试验，电转化效率为1.3×109CFU/μg DNA；以20%甘油（V/V）水溶液重悬细胞，电转化效率最高达到2.1×109CFU/μg DNA；而当往20%甘油（V/V）水溶液加入不同质量分数的甘露醇重悬细胞，相较于仅使用甘油水溶液重悬细胞，其效率均有一定程度提高，且以20%甘油（V/V）/1.5%甘露醇（m/V）溶液重悬细胞时，电转化效率最高达到3.3×109CFU/μg DNA。