《表1 VNTR位点扩增引物序列》

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《沈阳市2012年-2018年食源性致病菌监测金黄色葡萄球菌多位点可变数量串联重复序列分析分型》

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核酸提取应用Qiatube自动化核酸纯化仪（德国QIAGEN公司），PCR产物电泳使用QIAxcel全自动核酸分析系统（德国QIAGEN公司），引物由Life Technologies公司提供、Premix Ex Taq体系来自Promega公司。选择STTR1、STTR2、STTR3、STTR5、STTR6、STTR7、STTR8、STTR9，共8个VNTR位点[2]进行MLVA分型，扩增引物序列及重复基序大小见表1，20个样品进行每个VNTR位点的PCR扩增，反应体系:模板50 ng～100 ng，上游引物、下游引物（10μmol/L）各2μl，2×Taq Master Mix，加入去离子水补至50μl。反应条件:98℃变性10 s，56℃退火5 s，72℃延伸1 min，进行35个循环。对PCR产物采用Qiaxcel Advanced全自动核酸分析仪进行电泳分离，区分片段大小。