《表1 m RNA实时定量分析PCR引物特征》

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《软骨藻酸对海湾扇贝(Argopecten irradians)血淋巴免疫力和抗氧化力的影响研究》


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q PCR使用SYBR Premix Ex Taq?试剂盒(Ta Ka Ra,日本)在RT-PCR检测系统(Qiagen,德国)上进行。参考基因为β-actin,目标和参考基因的引物序列(Cu/Zn SOD、Mn SOD、GST、ACP和β-actin)列入表1。反应体系为12μL,其中包含6.25μL SYBR预混料Taq?,1μL正向引物,1μL反向引物和1μL c DNA和超纯水。反应条件如下:95℃下10 min,然后40个循环:95℃45 s,56℃45 s,72℃30 s。扩增结束后,对熔点曲线进行了分析。m RNA相对表达量使用2-ΔΔCt方法进行计算[20]。所有样品均进行了3次PCR重复。