《表2.RFa1序列启动子预测》

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《瘤胃微生物元基因组来源的新的组成型启动子获取》

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对于截短的RFa1p（224 bp）启动子序列，在距第一个预测的转录位点GTGTAC上游90 bp，第三个预测的转录起始位点CTCGAT上游88 bp，第三个转录起始位点CTCGAT上游43 bp处设计PCR引物，分别截取长度为137、76、31 bp的启动子片段RFa1p1、RFa1p2和RFa1p3，连接在质粒型探针载体pUC18GFP的酶切位点PstⅠ、KpnⅠ之间（图2），实验结果表明，RFa1p1、RFa1p2片断均能够启动GFP表达，RFa1p3片段不能启动GFP表达。启动子功能区域成功缩小到76 bp。