《表1 引物序列：低频超声联合5-FU对结肠癌HT-29细胞生物学特性的影响》

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《低频超声联合5-FU对结肠癌HT-29细胞生物学特性的影响》

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按照总RNA提取试剂盒说明书，提取处理后的肿瘤干细胞球的总RNA，经逆转录得到c DNA。应用荧光定量PCR（q RT-PCR）技术检测各组细胞干性相关基因的m RNA表达水平。本研究用CD133、CD44和Sox2的表达水平来表征结肠癌肿瘤干细胞干性的变化。引物序列见表1，GAPDH为内参基因。反应条件为:95℃预热15 min；94℃变性15 s，55℃退火30 s，60℃延伸30 s，共35个循环。每个反应孔的荧光信号达到设定阈值时的循环数即为Ct值。对检测得到的Ct值以相对定量的方法进行数据分析:mi RNA的相对表达量用2-ΔΔCt来计算。每个基因重复反应3次，进行独立实验3次。