《表2 RT-PCR所需引物》

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《FOXP3通过靶向S100A6启动子促进肺腺癌细胞迁移》


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A549细胞转染72 h后,收取细胞至1.5 m L EP管中并加入Trizol裂解,室温下孵育5 min,细胞提取RNA严格按照Ultrapure RNA Kit试剂盒中说明书操作,保留RNA定量OD260/OD280值在1.9~2.0之间的样品,然后按照Vazyme反转录试剂盒进行基因组DNA污染去除和第一链c DNA合成,将得到的c D-NA按照Hieff Qpcr SYBR Green Master Mix 10μL、上游引物0.5μL、下游引物0.5μL、c DNA 1μL、超纯水8μL共20μL体系,95℃预变性5 min,95℃变性10 s、退火60℃20 s、延伸72℃20 s,共39个循环,溶解曲线阶段按仪器默认设置。RT-PCR过程中所需引物如表2所示。RT-PCR所需引物见表2。