《表1 计算域边界条件:PRL对HC11细胞乳蛋白及其调节因子基因表达的影响》

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《PRL对HC11细胞乳蛋白及其调节因子基因表达的影响》


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为了确定催乳素是否对HC11细胞蛋白质相关基因、葡萄糖转运因子和细胞因子基因表达具有诱导作用,试验采用随机分组试验设计(同细胞增殖试验设计),分别研究了催乳素作用3 h和24 h对各基因表达的影响。具体方法同细胞增殖试验,即HC11细胞以2×105个/孔等密度接种于6孔板,即先用生长培养基(CGM)培养至细胞80%贴壁,然后用前PIM培养24 h,随后用PIM和(PIM+5 mg/m L)分别培养对照组和试验组细胞3 h和24 h后收获细胞,用于测定各基因表达。总RNA的提取采用RNeasy Plus Kit (Qiagen)试剂盒并按说明书进行,RNA的转录采用Super ScriptTM III Reverse Transcriptase (Invitrogen)试剂盒并按说明书进行,以GAPDH、β-actin和HPRT为内参,采用SYBR green试剂盒并按说明书对各基因m RNA表达量进行分析,基因表达量用2^(-△△CT)法进行计算。各个基因引物详见表1。