《表2 牦牛EPO、HIF-1α、HIF-3α和HIF-1AN基因q RT-PCR引物》
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《牦牛低氧适应相关基因启动子甲基化程度与组织差异表达关系研究》
根据Gen Bank数据库中普通牛EPO、HIF-1α、HIF-3α、HIF-1AN、β-actin、GAPDH基因序列(登录号见1.4)设计q RT-PCR引物用于相应基因的组织表达研究(表2)。用BIO-RAD CFX96荧光定量PCR仪筛选出RT-q PCR的最适温度后,以牦牛的心脏、肝脏、肺、脑、肌肉组织c DNA为模板,采用10μL反应体系:Sso Fast TM Eva Green?Supermix 5μL、上下游引物各0.5μL(10 pmol/L)、c DNA 1μL(0.5μg)、dd H2O 3μL进行q RT-q PCR,每个样本均设置3个重复,检测各基因的表达量。反应程序:95℃10 min、95℃15 s、最适温度1 min,40个循环;95℃15 s、65℃5 s。以β-actin基因和GAPDH基因作为内参基因,取平均值,用2-△△Ct法计算各基因表达量。
图表编号 | XD00201633400 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.12.10 |
作者 | 柏玛、胡明军、杨远潇、赵文仕、江明锋 |
绘制单位 | 云南香格里拉市畜牧兽医局饲料草山站、西南民族大学青藏高原研究院、西南民族大学青藏高原研究院、云南香格里拉市畜牧兽医局饲料草山站、西南民族大学生命科学与技术学院 |
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