《表1 Gly-RLK引物》

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《植物Gly-RLK基因家族鉴定及其在苹果中的表达分析》

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采用RNAout试剂盒（160906-50，Tiandz，北京）提取样品的总RNA，凝胶电泳和超微量分光光度计（P200+，Plextech，美国）进行RNA质量检测。取1μg RNA，采用试剂盒Prime ScriptTM RT reagent Kit with g DNA Eraser（RR047，Ta Ka Ra，大连）进行c DNA合成。利用SYBR?Premix Ex TaqTMⅡ（Tli RNase H Plus）(RR820，Ta Ka Ra，大连），在实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR，RT-q PCR）仪（Mx3005p，Stratagene，美国）上进行基因表达的定量分析。利用在线软件Primer 3.0(http：//primer3.ut.ee/）进行引物设计，内参基因Actin引物参考Botton等（2011）的报道，Gly-RLK基因引物序列见表1。反应结束后分析荧光值变化曲线及熔解曲线，并采用2-??CT计算基因的相对表达量（Livak&Schmittgen，2001）。