《表1 西瓜不定根的PCR检测引物》
(1)PCR检测:从每条不定根上分别剪取靠近根尖的少量根段,采用CTAB法提取DNA[17]。根据载体序列设计引物,进行常规PCR反应,有目的条带的即为阳性根(表1)。PCR反应体系为:DNA模版1μL,上、下游引物各0.5μL,2×PCR Master Mix 5μL,ddH2O 3μL。pCAM-BIA3301载体检测反应程序为95℃预变性3 min;95℃变性30 s,50℃退火30 s,72℃延伸50 s,35个循环;最后72℃延伸8 min,4℃保存。pCAM-BIA1300-ProSuper载体检测反应程序为95℃预变性3 min;95℃变性30 s,50℃退火50 s,72℃延伸1 min,35个循环;72℃延伸10 min,4℃保存。PCR扩增结束后进行1%的凝胶电泳验证。
图表编号 | XD001968100 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.12.10 |
作者 | 王平勇、徐永阳、赵光伟、贺玉花、孔维虎、张健、刘水苗、户克云、侯冲、王兰菊、徐志红 |
绘制单位 | 中国农业科学院郑州果树研究所、中国农业科学院郑州果树研究所、中国农业科学院郑州果树研究所、中国农业科学院郑州果树研究所、中国农业科学院郑州果树研究所、中国农业科学院郑州果树研究所、中国农业科学院郑州果树研究所、中国农业科学院郑州果树研究所、河南农业大学园艺学院、中国农业科学院郑州果树研究所、河南农业大学园艺学院、中国农业科学院郑州果树研究所 |
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