《表2 实验所用引物:达氏鳇(Huso dauricus)生长激素基因挖掘及生物信息学分析》

《表2 实验所用引物:达氏鳇(Huso dauricus)生长激素基因挖掘及生物信息学分析》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《达氏鳇(Huso dauricus)生长激素基因挖掘及生物信息学分析》


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根据NCBI已经公布的西伯利亚鲟的GH基因序列(JX003684.1)设计并合成引物扩增基因核心序列;构建RACE反应模板使用SMARTer誖RACE-5'/3'试剂盒(Clontech)操作手册,根据核心片段设计RACE扩增引物GH-3GSP、GH-3NGSP、GH-5GSP、GH-5NGSP (表2),Seq Amp TM DNA Polymerase (Clontech)试剂盒进行RACE扩增。利用1.2%的琼脂糖凝胶电泳进行扩增产物片断的检测,产物回收纯化按照DNA凝胶回收试剂盒(AXYGEN)说明进行,纯化后的产物连接到p MD18载体,转化至DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆,送至上海英俊生物技术有限公司测序。