《表4 纯化倍数模型方差分析》

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《基于疫苗颗粒完整性的硅胶吸附/解吸附纯化重组乙肝表面抗原工艺研究》

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根据回归方程绘制三因素交互作用的响应面图和等高线图，如图3和4所示，活性收率、纯化倍数与三个影响因素之间呈二次抛物线关系。影响因素数值上升时，活性收率和纯化倍数也上升，而达到极大值后，随之降低。当响应面较陡且等高线图呈椭圆形时，表明两者交互作用显著，反之则不显著。首先，在图3的活性收率模型中，吸附p H和洗脱p H的交互作用等高线图呈椭圆形，对模型影响相对其他两组显著。同一洗脱p H下，当吸附p H偏中性时，疫苗活性收率较高。同一吸附p H下，洗脱p H为10～11时，活性收率先上升后下降。结合蛋白稳定性研究结果可知，中性p H下疫苗结构稳定，而碱性溶液下，疫苗内部疏水趋于逐渐暴露，有利于解吸附，但p H过高则易导致疫苗发生解聚现象，活性收率受到影响。在图4纯化倍数模型中，三个等高线图均能看出明显的椭圆形，比较而言，吸附p H和洗脱温度交互作用的影响最显著，升高洗脱温度，为断开硅胶和抗原分子之间的作用提供能量，有利于抗原的解吸附。进一步分析得出两个模型最佳的纯化条件，其中纯化倍数的最佳吸附p H=7.16，这比活性收率（最佳吸附p H=7.43）低，可能是在较低p H下，杂蛋白不容易被硅胶吸附，因此纯化倍数最高；两者最佳洗脱p H相差不大，分别是10.48（活性收率模型）和10.52（纯化倍数模型）；洗脱温度也相差不大，分别是55.4℃（活性收率模型）和55.1℃（纯化倍数模型）。