《表1 sg RNA寡核苷酸序列》

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《gsdmd基因敲除巨噬细胞RAW 264.7的构建:基于CRISPR/Cas9系统》


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利用NCBI(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)网站,搜索gsdmd基因(ID:69146)信息。利用Zhang lab实验室网站(https://zlab.bio/guidedesign-resources),针对gsdmd基因3号外显子分别在其外侧设计4条sg RNA(图1A),选择两对评分综合较高的sg RNA,5'端分别加上Bsm BⅠ酶切位点的黏性末端(ACCG/AAAC),下划线处为Bsm BⅠ酶切位点,3'端加上sg RNA scaffold同源臂,由苏州金唯智生物科技有限公司合成序列(表1)。