《表2 Ca2+-ATPase活性反应体系》

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参考曹淑敏等[11]的方法，并稍作修改。按表2进行反应体系配制，25℃水浴10 min，加入1 m L 15%三氯乙酸使反应终止，将所得反应液离心5 min（6 500 r/min，4℃），取上清液1 m L于试管，依次添加1.0 m L硫酸钼酸溶液（先将70 m L浓硫酸加入434 m L水中制成溶液，再称取12.5 g(NH4）6MO7O24·4H2O，0.5 m L Elon试剂（3 g Na HSO3溶解于97 m L水中，再加入1 g Elon溶解），2.5 m L蒸馏水，充分振荡，室温下45 min发色后，在吸收波长640 nm处测定吸光值A。然后将预先在100℃干燥1 h后置于干燥器中干燥冷却的KH2PO4用5%HCl O3溶解，配成0.5 mmol/L的溶液作标准曲线。空白组在反应体系配制时，先加入TCA，再加入ATP溶液，测得空白组吸光度值B。求出1 mg蛋白质在1 min内产生无机磷量。计算公式为：