《表1 LPS在1%FBS时刺激Raw264.7细胞4 h所产生的TNF-α (pg/m L) 浓度》

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《利用非天然氨基酸代谢掺入法检测新生成蛋白》

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考察了LPS在1%FBS时刺激Raw264.7细胞4 h所产生的TNF-α浓度。当DMEM（-）培养基中含有1%血清时，用不同浓度的LPS刺激Raw-264.7细胞4 h，同时掺入Met或AHA。收集上清液，ELISA法检测上清液中的TNF-α浓度，结果如表1所示。当不加LPS时，细胞所产生的TNF-α本底浓度很低，随LPS浓度升高，TNF-α浓度显著升高；当LPS浓度高于10 ng/m L时，掺入AHA的细胞经LPS刺激后所产生的TNF-α浓度有所下降。综合以上结果，确定最优的实验条件为:在含有1%胎牛血清DMEM（-）培养基中，分别在不加LPS和加10 ng/m L的LPS条件下刺激Raw264.7细胞4 h，在刺激细胞的同时掺入AHA。