《表1 基因座D5S2500和D6S474的分型结果》

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《两种试剂盒中D5S2500和D6S474基因座分型不一致1例》

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当事人刘某因需要了解自己与孩子之间是否有父子关系，委托我中心进行亲缘关系鉴定。本中心采集两位被鉴定人的手指尖血样进行STR分型检测。使用常规Chelex-100法提取被鉴定人血样DNA[1]。在9700型扩增仪（美国AB公司）上分别采用AGCU EX22、AGCU 21+1（无锡中德美联生物技术有限公司）、Investigator HDplex试剂盒（德国Qiagen公司）对被鉴定人DNA样本进行扩增。使用310型基因分析仪（美国AB公司）对扩增产物进行毛细管电泳，使用GeneMapper v3.2软件（美国Thermo Fisher Scientific公司）对数据进行分析处理。结果发现同一个体在试剂盒AGCU 21+1与Investigator HDplex间出现了基因座D5S2500和D6S474等位基因分型结果不一致现象（表1）。为查明原因并明确被鉴定人正确的基因分型，我们重新设计了基因座D5S2500和D6S474的引物，PCR扩增后进行Sanger测序及TA克隆后进行测序分析。