《表6 引物605F/605R与目标和非目标片段错配位点Table 6 Mismatch sites between 605F/605R primers with target fragments a
本文针对滇池水域的硅藻运用Primer Premier5.0软件设计引物,通过人工筛选获得引物605F/605R、467F/467R。引物605F/605R与五类目标扩增类群存在1位碱基错配,与非目标扩增类群存在较多位点错配;引物467F/467R与目标扩增类群无错配位点,与非目标扩增类群错配位点相对较少(表6~7)。从理论上分析,引物605F/605R相对467F/467R其特异性较强敏感性略差。而测序结果显示,四对引物都能扩增得到硅藻18sr DNA片段。引物605F/605R的扩增效率最高,硅藻检出率74%,检出5类硅藻;引物467F/467R硅藻检出率约56%,检出2类硅藻;引物18s F/18sR、A145F/Dia516R硅藻检出率明显偏低;并且18s F/18sR克隆子载体引物扩增测序的效率明显低下,可能与其片段长度偏长不适合挑取菌落直接进行PCR检测有关。综上,引物605F/605R敏感性及特异性明显优于其余3对引物。
图表编号 | XD0018703000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2018.06.20 |
作者 | 胡蝶、程宝文、邢豫明、皮之云 |
绘制单位 | 昆明医科大学法医学院、昆明医科大学法医学院、云南省公安厅、昆明医科大学法医学院、云南省公安厅、昆明医科大学法医学院 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |