《表1 该研究结果与已发表结果的对比》

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《图像辅助流式细胞仪在鲫鱼血细胞分析中的应用》

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注:*该数据是根据引用文献中的分类计数结果计算所得Note:*Results were calculated based on published papers

该研究利用图像辅助流式细胞仪对鲫鱼血细胞进行了初步的自动化分类分析和应用的探索。在区分有核红细胞与白细胞类群边界方面，该仪器表现出了极大的优势。与常规流式细胞仪需要将样品回收分析后才能确定样点特征不同，该仪器可以直接通过同步采集的图像对样点进行甄别；更为重要的是，可以针对任意一个样点单独分析，这对于常规流式细胞仪而言，相当于连续单独回收类群边界的每一个细胞再加以甄别，实际上在操作中是无法实现的。前向散射和侧向散射特征对于不经荧光标记的细胞是较为常用的区分指标，但在无法去除的大量有核红细胞的干扰下，很难发挥其区分效力。该研究也遇到了这种情况，不但有白细胞混杂在红细胞类群当中，而且白细胞与红细胞的类群边界也不清晰，虽然在红细胞和白细胞各自样点聚集范围之间存在低密度区，但通过单独样点的明场图像辨识发现此区域仍然是混合细胞群。该研究又进一步尝试利用该仪器独有的明场图像信息对血细胞进行分群分析，获得了较为理想的结果。以面积和长宽比为坐标系的散点图可以呈现出较为清晰的2个细胞聚集区。位于面积较小的区间内的细胞数量占绝大多数，且具有红细胞的典型特征，体积较小，长宽比较大，加之胞内缺乏类似白细胞内的复杂膜系统，所以甲醛固定后更容易收缩，其体积与大部分白细胞甚至其中的小淋巴细胞的差距都更为明显，所以整个类群几乎不含有明显可辨的白细胞。另一方面，从白细胞类群的占比也可作出同样的推断，该方法设定的白细胞门内所包含的白细胞占比与已报道的同类研究结果吻合（表1）。更为重要的是，同步采集的每个样点的明场图像提供了其形态学的佐证。