《表2 与TaFBL14互作的靶蛋白》

《表2 与TaFBL14互作的靶蛋白》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《小麦F-box/LRR类基因TaFBL14的抗逆相关表达模式及互作蛋白鉴定》


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利用酵母文库筛选技术进行实验,发现稀释1 000×的交配产物在二缺平板上有61个单菌落产生,根据稀释倍数、涂布体积以及在二缺平板上生长的菌落数,计算出筛选文库转化效率为3.05×105cfu·μg-1。经两轮四缺平板筛选,共得到45个单克隆,再次以1、10、100三个稀释倍数重新在四缺固体培养基上划线培养,其中19个单克隆可以在四缺平板上呈现良好生长状态。将这些单克隆利用四缺液体培养基摇菌,培养液经菌落PCR扩增后,产物单一的克隆送交北京中科希林生物科技有限责任公司进行测序,测序结果在NCBI网站上进行BLASTx比对,证实ATP synthase CF1βsubunit(CF1)、Profilin-1(Pro)、Chloroplast-localized Ptr ToxA-binding protein1(Tox A)、Chitinase 2(Chi 2)、Sterol C-14 reductase(SC-14)、Peroxidase 51-like(POD)、Glucan endo-1,3-β-glucosidase GV(GV)、Salt stress protein 8(SSP 8)等11类蛋白可能与Ta FBL14存在蛋白互作(表2)。