《表1 引物列表：甘蓝型油菜BnaA06.mTERF1基因的功能及进化分析》

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《甘蓝型油菜BnaA06.mTERF1基因的功能及进化分析》

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注：下划线的部分是酶切位点；RT-F和RT-R是内参基因[29]

通过BLAST比对发现，拟南芥mTERF1在甘蓝型油菜中存在两个拷贝，分别为BnA06g0263830.1和BnC07g0802960.1。本研究以BnA06g0263830.1基因为研究对象，参考甘蓝型油菜中双11数据库[28]提供的BnaA06.mTERF1基因的全长序列，以中双11叶片DNA为模板，利用Primer Premier 5.0软件设计基因特异性引物进行PCR扩增。PCR反应体系为：DNA模板2μL，2×KOD Buffer 12.5μL，dNTP2.5μL，引物BnaA06.mTERF1（Sma I）-F、BnaA06.mTERF1（Xba I）-R（表1）各0.3μL，TOYOBO KOD Plus 0.4μL，加ddH2O补足25μL。PCR程序为：95℃预变性2 min，98℃，15 s；57℃，30 s；72℃，5 min；34个循环，最后72℃延伸5 min，4℃保存。PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳检测并按天根纯化回收试剂盒（Code:DP209）进行目的片段的回收。