《表1 引物序列：SMA小鼠中相关剪接因子表达与SMN2外显子7列入比率关系研究》

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《SMA小鼠中相关剪接因子表达与SMN2外显子7列入比率关系研究》

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反应体系:SYBR Green Master Mix 10μL，上游引物1μL，下游引物1μL，cDNA 1μL，补灭菌双蒸水7μL至20μL体系，每个样品设置3个重复。反应条件:95℃预变性4 min，94℃下变性15 s，60℃下退火20 s，72℃延伸20 s并读取荧光值，45次循环，循环后设置55℃～90℃，每隔0.3℃读荧光值生成熔解曲线。所有设定保存后运行程序。反应完成后，选择PCR base line subtracted模式进行数据分析和修正。在调整baseline cycles和计算threshold value（阈值）后，得出cycle threshold（Ct值），ΔΔCt法计算出样本的相对表达量（RQ值）。在gene bank中查找并下载相关基因的mRNA序列及相关信息，实时荧光定量PCR引物采用Primer premier 5.0软件，严格按照相关原则设计。引物信息见表1。