《表1 real-time PCR引物序列》

《表1 real-time PCR引物序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《miR-375对人类诱导多能干细胞向胰岛素分泌细胞分化的影响》


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诱导期间收集的各组细胞,按照TRIzol总RNA提取试剂的操作说明书进行总RNA的提取,测定纯度和浓度后按照试剂盒说明书建立反应体系合成cDNA并完成real-time PCR检测(引物序列见表1),动态监测各组hiPSCs分化为胰腺β细胞的过程中相关转录因子Pdx1、Pax6、Nkx6.1、MafA、insulin、glucokinase和HNF4α的表达变化,以GAPDH为内参照,反应条件为:95℃30 s;95℃5 s,60℃35 s,40 cycles。以第0天的正常hiPSCs作为对照,采用2-ΔΔCt法计算各基因的相对表达量。