《表1 抗EpCAM+CD3 BsAb完整抗体及各亚基相对分子质量分析结果》

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《抗EpCAM+CD3双特异性抗体关键表征解析》

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完整抗体LC-MS/MS数据经BioFinder 3.0软件分析得到质谱图（图1-B、D）、解卷积图（图1-A、C、E）和完整抗体相对分子质量（表1）。完整抗体主峰相对分子质量为128 521.78，与理论相对分子质量（128 522.55）偏差-0.77，在±2误差范围内，对应2条重链C-末端赖氨酸截除（2×K＿Loss）的变体。经去糖基化处理后，主峰（2×K＿Loss）相对分子质量为125 633.30，与完整抗体差2 888.48，Fc段存在对称N-糖基化位点，据此计算主峰N-糖相对分子质量为1 444.24，对应糖型为A2G0F(1 444.53），初步确定主峰糖型为G0F/G0F。完整抗体3个峰对应的相对分子质量分别为128 317.48、128 521.78和128 723.79（图1-C），相邻峰相对分子质量之差约为204，对应1个N-乙酰葡糖胺（N-acetylglucosamine，GlcNAc，表述为Gn），初步推测其糖型为G0F-Gn、G0F/G0F和G1F-Gn。LC-MS/MS检测结果显示抗EpCAM+CD3 BsAb实测相对分子质量与理论相对分子质量一致，分子中存在C-末端赖氨酸截除（K＿Loss）和N-糖基化修饰。