《表1 引物:新生儿粪便中分离的粪肠球菌(Enterococcus faecalis)RZ18提高肠道黏膜屏障完整性》

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《新生儿粪便中分离的粪肠球菌(Enterococcus faecalis)RZ18提高肠道黏膜屏障完整性》


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HT-29细胞以104m L-1的密度均匀铺种在6孔板中培养2 d,经加入5 mg/m L样品处理24 h后,Trizol法提取HT-29细胞中RNA,用M-MLV逆转录酶逆转录2μg样品.Real-time PCR法检测MUC2、OCLN、CLDN1、ZO-1基因的表达.PCR体系:10μL DDW,7.6μL Mix,0.4μL Rox,0.5μL上游引物,0.5μL下游引物,1μL cDNA模板.PCR反应条件:95℃预变性2 min,95℃变性10 s,60℃退火和延伸30 s,共40个循环,95℃终止反应15 s.所用引物见表1.